Identificação e caracterização de genes vip e cry coleóptero‑específicos em isolados de Bacillus thuringiensis

Meire de Cássia Alves, Juliana Regina Rossi, Maria Gabriela Fontanetti Rodrigues, Eliane Cristina da Cunha Alves, Antonio Sergio Ferraudo, Manoel Victor Franco Lemos, Janete Apparecida Desidério, Odair Aparecido Fernandes

Resumo


O objetivo deste trabalho foi identificar e caracterizar os genes cry3, vip1, vip2 e vip1/vip2 em uma coleção de 1.078 isolados de Bacillus thuringiensis potencialmente tóxicos para larvas de coleópteros. Foram utilizados pares de oligonucleotídeos iniciadores gerais obtidos a partir de regiões conservadas dos genes e do alinhamento de sequências consenso. Posteriormente, os isolados positivos foram caracterizados por meio da técnica de PCR‑RFLP, tendo‑se utilizado enzimas de restrição específicas, para identificar novas subclasses de genes nos isolados. Cento e cinquenta e um isolados foram positivos para os genes avaliados, com maior frequência para o gene vip1/vip2 (139 isolados). Pela técnica de PCR-RFLP, foram observados 14 perfis polimórficos, o que indica a presença de diferentes alelos e, consequentemente, de distintas subclasses desses genes.

Palavras-chave


bioprospecção; Coleoptera; controle biológico; PCR-RFLP; proteínas inseticidas vegetativas; toxicidade

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