Otimização dos parâmetros de bombardeamento de partículas para a transformação genética de linhagens brasileiras de milho

Caroline Pereira Petrillo, Newton Portilho Carneiro, Antônio Álvaro Corsetti Purcino, Carlos Henrique Siqueira Carvalho, José Donizeti Alves, Andréa Almeida Carneiro

Resumo


O objetivo deste trabalho foi desenvolver um sistema de transformação genética para genótipos tropicais de milho pelo bombardeamento de embriões imaturos com micropartículas. O bombardeamento com
partículas foi realizado utilizando-se uma construção gênica contendo os genes bar e uidA sob o controle do promotor CaMV35S. As melhores condições para transformação das linhagens de milho tropical L3 e L1345
foram obtidas após o cultivo de embriões imaturos durante 4 horas, antes do bombardeamento, em alta osmolaridade, e bombardeados com a pressão de 1.100 psi de gás hélio, dois tiros por placa e uma distância de vôo da micropartícula de 6,6 cm. As freqüências de transformação obtidas variaram entre 0,9 e 2,31%. A integração dos genes heterólogos no genoma das plantas transgênicas de milho foi confirmada por análises de Southern blot e expressão dos genes bar e uidA. O protocolo de transformação genética de milho desenvolvido neste estudo irá aumentar, provavelmente, a eficiência de produção de novas linhagens tropicais de milho expressando características agronômicas desejáveis.

Palavras-chave


Zea mays; glufosinato de amônio; beta-glucuronidase; embriões imaturos; fosfinotricina acetil transferase; transformação de plantas

Texto completo:

PDF


Embrapa Sede
Parque Estação Biológica - PqEB - Av. W3 Norte (final) Caixa Postal 040315 - Brasília, DF - Brasil - 70770-901
Fone: +55 (61) 3448-2461